一种亮氨酸-5-羟化酶突变体及其应用
技术类型 ： 专利
专利所属地 ：中国
公开号 ：-
技术成熟度 ：正在研发
发布时间：2018-01-01
同类技术 ：无
合作案例：无
转让方式 ：技术转让
交易价格：面议
应用领域 ： 专用化学产品制造
技术领域 ：微生物发酵技术
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成果概况
简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种活性提高的亮氨酸?5?羟化酶突变体及其应用。
本发明通过分子生物学手段获得念珠藻(Nostoc punctiforme)NIES?2108来源的亮氨酸?5?羟化酶编码基因，采用反向PCR进行定点突变获得编码突变体的基因，而后将编码突变体的基因进行异源表达获得亮氨酸?5?羟化酶的突变体V77A。
该突变体以亮氨酸和蛋氨酸为底物时，其相对酶活性较野生型分别提高了69.53％、23.26％。
本发明筛选出的活性提高的变异体，可以更高效地使亮氨酸远端的5号碳位实现羟基化，并且可催化蛋氨酸生成蛋氨酸亚砜，为工业上药物中间体的酶法催化生产提供广阔的前景。
技术优势
暂无信息
市场优势/合作案例
暂无信息
成果荣誉
暂无信息
项目负责人：
专利基本信息
| 专利名称 | 一种亮氨酸-5-羟化酶突变体及其应用 | ||
| 专利状态 | 申请中未授权 | 公开号 | - |
| 申请号 | CN109576234A | 专利申请日期 | 2018-12-26 |
| 专利授权日期 | 0001-01-01 | 专利权届满日 | - |
| 专利所属地 | 中国 | 专利类型 | 发明 |
| 发明人 | 秦慧民;路福平;孙登岳;李玉;毛淑红 | ||
| 权利人 | 天津科技大学 | ||
| 专利摘要 | 本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种活性提高的亮氨酸‑5‑羟化酶突变体及其应用。本发明通过分子生物学手段获得念珠藻(Nostoc punctiforme)NIES‑2108来源的亮氨酸‑5‑羟化酶编码基因，采用反向PCR进行定点突变获得编码突变体的基因，而后将编码突变体的基因进行异源表达获得亮氨酸‑5‑羟化酶的突变体V77A。该突变体以亮氨酸和蛋氨酸为底物时，其相对酶活性较野生型分别提高了69.53％、23.26％。本发明筛选出的活性提高的变异体，可以更高效地使亮氨酸远端的5号碳位实现羟基化，并且可催化蛋氨酸生成蛋氨酸亚砜，为工业上药物中间体的酶法催化生产提供广阔的前景。 | ||