本发明涉及一种用于甾体化合物A环1，2位脱氢的基因工程菌及发酵剂，所述工程菌的宿主菌为简单节杆菌，保藏编号为ACCC12070，所述基因工程菌内含有如序列2所述的重组基因片段。

所述基因工程菌的发酵底物包括醋酸可的松、含氟皮质激素、4‑AD。本发明构建的工程菌在含有酵母提取物、磷酸盐、玉米浆和葡萄糖等营养成分的基础上，通过恒温通气搅拌发酵，在甾体化合物浓度不高于10%(m/V)时，采用一次加投甾体化合物底物，在32～48小时内生物脱氢转化率能够达到95%以上；在甾体化合物浓度高于10%时，采用连续补加甾体化合物底物的情况下，在60小时内生物脱氢转化率能够达到95%以上。