耐冷冻面包酵母基因工程菌种的选育本项目建立了酵母的无痕基因敲除系统，将为酵母的基因操作提供一种新的敲除方法。利用靶基因附近的基因序列作为正向重复，大大提高了敲除效率，以URA3为正反筛选标记，建立了一种面包酵母目的基因无痕敲除的新方法，对推动酵母的分子遗传研究具有重要意义。

该敲除系统切除目的基因不引入任何外源序列，所以可用于同一菌株多基因连续敲除；而且该系统可以在不影响工业酵母特性的前提下完成敲除工作，所获菌株不存在安全隐患，可以直接用于工业生产，对我国酵母工业的发展和冷冻面团技术的推广应用具有重要意义。

选育出优良的耐冷冻面包酵母菌株，为我国面包行业提供一种新型的面包酵母菌种。在面包酵母海藻糖代谢途径和耐冷冻机制分析的基础上，通过各种面包酵母海藻糖酶敲除突变株的耐冷冻性、海藻糖积累能力和面团发酵性能分析，选育出耐冷冻的优良面包酵母菌株。

无痕基因敲除技术的应用，不仅没有引入任何外源DNA序列，而且也没有改变选育的面包酵母菌株其他发酵特性，选育出的优良菌株可用作工业生产菌种。优良耐冷冻面包酵母菌种的选育对提高我国烘焙食品工业的生产技术水平，促进我国面包酵母工业的发展和冷冻面团技术的推广应用具有重要意义。