技术类型 : 非专利
技术成熟度 :正在研发
发布时间:2014-01-01
转让方式 :技术转让、其他
交易价格:面议
应用领域 :生物基材料制造
技术领域 :天然药物生物合成制备技术
本发明涉及一种磷脂酶A2突变体及其制备的方法,其技术方案是利用重组DNA技术定点突变来源于天蓝色链霉菌的野生型磷脂酶A2的Glu37、Asp78的氨基酸残基,得到活力较高的磷脂酶A2基因。
然后将高活力磷脂酶A2基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达,得到产高活力磷脂酶A2的重组菌株。
表达后,检测高活力磷脂酶A2的比酶活较野生型磷脂酶A2提高13.7%,其中枯草芽孢杆菌高活力磷脂酶A2重组菌发酵后磷脂酶A2的酶活可达到53.5U/ml,毕赤酵母游离表达高活力磷脂酶A2重组菌的酶活可达106.4U/ml,毕赤酵母细胞表面展示高活力磷脂酶A2全细胞催化剂的酶活可达260U/(g·干细胞)。