技术类型 : 专利
专利所属地 :中国
公开号 :CN201410279966.3
技术成熟度 :正在研发
发布时间:2014-01-01
转让方式 :技术转让、其他
交易价格:面议
应用领域 : 生物基材料制造
技术领域 :天然药物生物合成制备技术
本发明涉及一种磷脂酶A2突变体及其制备的方法,其技术方案是利用重组DNA技术定点突变来源于天蓝色链霉菌的野生型磷脂酶A2的Glu37、Asp78的氨基酸残基,得到活力较高的磷脂酶A2基因。
然后将高活力磷脂酶A2基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达,得到产高活力磷脂酶A2的重组菌株。
表达后,检测高活力磷脂酶A2的比酶活较野生型磷脂酶A2提高13.7%,其中枯草芽孢杆菌高活力磷脂酶A2重组菌发酵后磷脂酶A2的酶活可达到53.5U/ml,毕赤酵母游离表达高活力磷脂酶A2重组菌的酶活可达106.4U/ml,毕赤酵母细胞表面展示高活力磷脂酶A2全细胞催化剂的酶活可达260U/(g·干细胞)。
专利名称 | 一种磷脂酶A2突变体及其制备方法 | ||
专利状态 | 公开 | 公开号 | CN201410279966.3 |
申请号 | CN104017786A | 专利申请日期 | 2014-06-20 |
专利授权日期 | 2016-06-15 | 专利权届满日 | 2034-06-20 |
专利所属地 | 中国 | 专利类型 | 发明 |
发明人 | 路福平;刘逸寒;张涛;刘晓光;王正祥;王春霞;王建玲 | ||
权利人 | 天津科技大学 | ||
专利摘要 | 本发明涉及一种磷脂酶A2突变体及其制备的方法,其技术方案是利用重组DNA技术定点突变来源于天蓝色链霉菌的野生型磷脂酶A2的Glu37、Asp78的氨基酸残基,得到活力较高的磷脂酶A2基因,然后将高活力磷脂酶A2基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达,得到产高活力磷脂酶A2的重组菌株,表达后,检测高活力磷脂酶A2的比酶活较野生型磷脂酶A2提高13.7%,其中枯草芽孢杆菌高活力磷脂酶A2重组菌发酵后磷脂酶A2的酶活可达到53.5U/ml,毕赤酵母游离表达高活力磷脂酶A2重组菌的酶活可达106.4U/ml,毕赤酵母细胞表面展示高活力磷脂酶A2全细胞催化剂的酶活可达260U/(g·干细胞)。 |