本发明涉及一种细胞表面展示磷脂酶D酵母全细胞催化剂催化制备磷脂酰丝氨酸的方法,步骤为：将全细胞催化剂加入含有丝氨酸、CaCl2、Triton-X100的醋酸缓冲液中,与含有卵磷脂的氯仿溶液混合均匀,在30℃下混合得到均匀的乳状液反应5-6小时；反应结束后静止自然分层,提取有机相；有机溶剂挥发后剩余物经氯仿洗涤两次,即可得到磷脂酰丝氨酸。本发明利用磷脂酶D的高度专一性,催化卵磷脂和丝氨酸生成磷脂酰丝氨酸,且全细胞催化剂具有固定化酶的优点,可重复使用,有效解决了目前提浸法和化学合成法存在的问题,制备工艺简单,适合工业化生产。