本发明属于生物催化技术领域,更具体地涉及一种降低氮源用量的甾体药物前体高效生产方法。该方法是通过敲除甾体药物前体生产菌株中的氮源转录调节因子glnR基因实现的。所获得的基因工程菌比改造前的原始菌株在低氮源下具有更高的生物量及菌体活力,AD的生产能力也得到加强。使用本方法描述的基因工程菌进行工业生产可在降低氮源需求的情况下提高转化率,可大大提高生产效率降低生产成本。