本发明公开了一种富含益生菌酱油的制备方法及益生菌酱油,通过制备益曲剂,在酱油制曲阶段加入益生菌,同时制备益酵液,实现在酱油的制曲和发酵阶段加入益生菌,明显提高酱油的风味水平,削弱杂菌对酱油风味的影响,添加益生菌可以在发酵过程中和保质期内抑制腐败微生物的生长,保证酱油的安全。本发明首次提出向灭菌后的酱油中直接添加植物乳杆菌,抑制有害杂菌的生长,显著的提高酱油的保藏时间。