本发明提供了一种左旋多巴生产菌株的定向改造方法及生产菌株与左旋多巴发酵方法,菌株是通过左旋多巴代谢合成途径改造得到的,左旋多巴生产菌株LDp10能够以葡萄糖为碳源,从头合成左旋多巴,无需添加酪氨酸底物,具有生产速率高,发酵周期短、菌株稳定性高与成本低的优点,为实现左旋多巴的大规模生产奠定基础,通过发酵罐发酵方法利用左旋多巴生产菌株LDp10在机械搅拌式发酵罐中生产左旋多巴,发酵36h生产左旋多巴15g/L,具有良好的工业化前景。