一种甾体16β-羟化酶CYP65重组酵母菌的构建及其应用
技术类型 ： 专利
专利所属地 ：中国
公开号 ：CN202110316705.4
技术成熟度 ：正在研发
转让方式 ：技术转让
交易价格：面议
应用领域 ： 生物药品制品制造
技术领域 ：生物治疗技术和基因工程药物
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成果概况
简介
本发明专利提供了一种表达甾体16β-羟化酶CYP65的重组酵母菌,它能够高效转化甾体底物4-AD,进而高效制备C16β-OH-4-AD。具体涉及利用基因工程技术构建了两个敲除载体,并根据同源重组的原理定向敲除了酵母NS17中的醛酮还原酶基因GCY1和YPR1,获得了一个双敲除醛酮还原酶基因GCY1和YPR1的酵母菌NS17平台。同未改造的酵母NS17菌株相比,该双敲除酵母菌株对底物4-AD的还原明显减少。将表达载体pYES2-CYP65分别转化至双敲除酵母菌株和原始酵母菌株NS17中,结果表明对底物4-AD的羟化特异性明显提高。
专利基本信息
| 专利名称 | 一种甾体16β-羟化酶CYP65重组酵母菌的构建及其应用 | ||
| 专利状态 | 其他 | 公开号 | CN202110316705.4 |
| 申请号 | CN115125154A | 专利申请日期 | 2021-03-25 |
| 专利授权日期 | 0001-01-01 | 专利权届满日 | - |
| 专利所属地 | 中国 | 专利类型 | 发明 |
| 发明人 | 天津科技大学 | ||
| 权利人 | 刘晓光,贾曦,路福平 | ||
| 专利摘要 | 本发明专利提供了一种表达甾体16β-羟化酶CYP65的重组酵母菌,它能够高效转化甾体底物4-AD,进而高效制备C16β-OH-4-AD。具体涉及利用基因工程技术构建了两个敲除载体,并根据同源重组的原理定向敲除了酵母NS17中的醛酮还原酶基因GCY1和YPR1,获得了一个双敲除醛酮还原酶基因GCY1和YPR1的酵母菌NS17平台。同未改造的酵母NS17菌株相比,该双敲除酵母菌株对底物4-AD的还原明显减少。将表达载体pYES2-CYP65分别转化至双敲除酵母菌株和原始酵母菌株NS17中,结果表明对底物4-AD的羟化特异性明显提高。 | ||