本发明涉及发酵工程和基因工程技术领域,涉及一种可利用甘油高转化率合成乳酸单体的生产菌株及其获得方法,具体为细胞生长相关关键调控基因的克隆、表达、删除和以甘油为原料的乳酸单体的发酵生产。本发明体提供的工程菌以具有乳酸生产能力的菌株为宿主,通过温敏型质粒在宿主内游离表达PDH复合体中的关键酶的编码基因,然后再缺失宿主染色体上的上述关键酶的编码基因,获得细胞生长和增殖可以通过培养温度进行调控的乳酸单体生产新菌种,该菌种在配套的变温微好氧发酵工艺条件下甘油到乳酸的转化率提高到96％以上。