本发明公开了一种新型转座子突变文库的构建系统,可通过化学转化和电转化法把质粒转进目的菌株中,然后诱导转座酶的表达,只需一个含有转座子的突变株,就能得到几乎覆盖全基因组范围内的转座子突变文库。这种新型转座子文库的构建系统不仅可以增大转座突变的多样性,更有助于菌株插入位置的确定,有助于研究铜绿假单胞菌的基因组注释、功能分析及其耐药机制的研究。