一种新型磷脂酶D及其制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸的方法

一种新型磷脂酶D及其制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸的方法

技术类型 : 专利

专利所属地 :中国

公开号 :CN201610402557.7

技术成熟度 :正在研发

转让方式 :技术转让

交易价格:面议

应用领域 : 合成材料制造

技术领域 :精细化学品制备及应用技术

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成果概况
简介
本发明属于酶的基因工程技术领域,具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变,得到活力较高的磷脂酶D基因,然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达,得到产高活力磷脂酶D的重组菌株,表达后,检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38-140%,高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/(g·细胞干重)。
专利基本信息
专利名称 一种新型磷脂酶D及其制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸的方法
专利状态 其他 公开号 CN201610402557.7
申请号 - 专利申请日期 2016-06-02
专利授权日期 2019-07-19 专利权届满日 2039-07-19
专利所属地 中国 专利类型 发明
发明人 天津科技大学
权利人 刘逸寒, 路福平, 刘浩
专利摘要 本发明属于酶的基因工程技术领域,具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变,得到活力较高的磷脂酶D基因,然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达,得到产高活力磷脂酶D的重组菌株,表达后,检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38-140%,高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/(g·细胞干重)。