本发明公开了一种果蔬生物保鲜涂料及其制备方法与应用,该保鲜涂料包括壳聚糖、纳米纤维素、交联剂、抗菌剂、其他助剂和去离子水。本发明制得的果蔬生物保鲜涂料具有良好的成膜性、抗菌性、氧气和水蒸气阻隔性。通过浸涂或喷涂的方式在果蔬表面形成一层具有阻隔性和抗菌性的微纳米级薄膜,可有效延缓果蔬采摘后的腐烂进程,延长果蔬的货架寿命,减少浪费,同时该保鲜涂料原料来源于生物基材料,安全环保,对食品安全没有风险。本发明制备的保鲜涂料也可制备成保鲜膜,可广泛应用于果蔬保鲜领域和食品包装材料领域,具有较高的商业应用价值。