本发明公开了一种具有体外高抗氧化活性的灰树花(Grifola frondosa)多糖的制备和提纯方法,所述方法是在灰树花液体发酵初始时或发酵过程中加入法尼醇。本发明方法通过在灰树花菌丝体液体发酵过程中添加法尼醇,促使灰树花发酵液多糖产量变化,显著提高灰树花发酵所产生酸性多糖组分的产量,在不增加原有发酵周期的基础上,显著提高了灰树花发酵液多糖产量,最大提高幅度达149％,经分离纯化后的酸性多糖含量由7.4％增加到58.2％,经分离纯化后的酸性多糖的体外抗氧化活性相比对照组显著提高,且外源添加物法尼醇安全无毒且稳定性高,从而为工业化生产灰树花发酵液多糖奠定基础。