本发明公开了一种农药烯啶虫胺半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法与应用,涉及具有6－羧乙巯基分子结构的烟碱类农药烯啶虫胺小分子化合物人工半抗原、免疫原,包被原和抗体的制备及其免疫分析方法的建立方面。本发明克服了传统的理化分析方法繁琐复杂、成本较高、分析速度慢的问题,提供了简便、快速、灵敏、准确的免疫分析技术。它以(E)-N-(6-羧乙巯基-3-吡啶甲基)-N-乙基-N＇-甲基-2-硝基亚乙基二胺为半抗原,分别与牛血清蛋白和卵清蛋白连接合成免疫原和包被原。人工抗原再经动物免疫、取血、分出抗血清、纯化制得抗体。使用该抗体建立的烯定虫胺免疫检测方法具有良好的特异性和灵敏度,检测限可以稳定达到0.20±0.02ng?L-1,且半抗原合成方法简便,具有良好的应用前景。