本发明公开了一种芳香化酶基因工程菌及构建方法,通过PCR技术克隆人类芳香化酶基因的主功能区并与毕赤酵母胞外表达质粒pPIC9K连接,通过电转化导入到毕赤酵母GS115中得到重组基因工程菌,利用构建好的基因工程菌发酵制备重组芳香化酶,并测定重组芳香化酶的酶活。本发明将人类芳香化酶基因整合到毕赤酵母染色体上,获得重组毕赤酵母,用该菌胞外活性表达芳香化酶。本发明涉及一种芳香化酶在毕赤酵母中胞外表达的方法,为芳香化酶的表达提供一种新的途径。