本发明公开一种由木质纤维素降解液作碳源制备细菌纤维素的方法,属于生物材料降解及制备技术领域,包括下列步骤：首先进行木质纤维素原料预处理。然后利用纤维素酶降解处理后的木质纤维素。酶解后的降解液经过脱毒,然后离心、过滤,得上清液,利用HPLC测定其中酶解所产生的可发酵糖浓度后,添加其他营养物质配制成木葡糖酸醋杆菌的培养基,接种后,放入30℃的恒温培养箱中培养7d,产生细菌纤维素膜。取出膜后用去离子水和氢氧化钠溶液清理干净,得到纯净的细菌纤维素膜。本发明生产的细菌纤维素膜具有较好的持水性,生物相容性和较高的力学强度。本发明中木质纤维素原料为小麦秸秆,其来源广泛,对于减少资源浪费,保护环境,降低发酵成本,具有重要意义。