本发明提供一种抑制黄曲霉的复合发酵物及其制备方法和应用,涉及微生物技术领域,本发明所述抑制黄曲霉的复合发酵物,为植物乳杆菌、乳酸片球菌和凝结芽孢杆菌中的两种或三种的复合发酵上清液。如本发明具体实施例记载的黄曲霉抑菌试验所示,乳酸片球菌、植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌的发酵上清液的浓缩物均对黄曲霉的生长有抑制作用,乳酸片球菌、植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌复合发酵的复合发酵上清液的浓缩物也对黄曲霉的生长有抑制作用。本发明提供的复合发酵物为乳酸片球菌、植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌中两种或三种的复合发酵产物,对人和环境安全。因而本发明提供了一种安全有效的黄曲霉抑制剂。