本发明涉及一种非细胞系统抗氧化体系的构建及应用,通过筛选细胞内抗氧化酶对活性氧水平的影响,获得超氧化物歧化酶与过氧化氢酶sodB-katE组合,构建过表达菌株,制备相对应的非细胞提取物,使非细胞系统蛋白合成过程中活性氧水平降低24-31％,通过加入RGG无膜腔室,区室化抗氧化酶,使活性氧水平降低36％。利用构建的抗氧化酶体系,非细胞系统合成蛋白产量提高14％左右。本发明利用酶法构建了非细胞抗氧化体系,补充了目前该方向的空白,降低了非细胞蛋白合成过程中活性氧水平,减少了活性氧对蛋白合成的危害,并提高了非细胞系统的蛋白产量。为以后研究非细胞系统活性中间物,氧化还原以及氧代谢提供了帮助。