本发明属于微生物、发酵技术领域,公开了一种复合微生物液态发酵烟草烟叶制备香精香料的方法及酿酒酵母,所述方法以黑曲霉、红曲霉和酿酒酵母为发酵菌种混合发酵次级烟叶。本发明方法以红曲霉、黑曲霉和酿酒酵母为发酵菌种,基于混菌协同发酵及代谢控制技术,以烟草烟叶、烟梗、碎末等为发酵原料,生产的香精香料具有典型香气特征,增香效果显著,可吸性高。采用本发明方法制备的香精香料,其致香成分物质含量显著提高,醇类和酯类物质相对增加50%以上。