技术类型 : 专利
专利所属地 :其他国家、地区
公开号 :CN201810020944.3
技术成熟度 :正在研发
发布时间:2018-01-01
转让方式 :技术转让、其他
交易价格:面议
应用领域 : 生物药品制品制造
技术领域 :生物治疗技术和基因工程药物
本发明提供一种高产尿苷的基因工程菌及其构建方法与应用,该菌是在大肠杆菌的基因组上整合了核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的嘧啶核苷操纵子pyrBCAKDFE,并由强启动子Ptrc启动,重构了尿苷合成途径;在基因组上对其自身的PRPP合成酶编码基因prsA进行双拷贝,由强启动子Ptrc启动;同时缺失尿苷激酶(udk)、尿苷磷酸化酶(udp)和核苷水解酶(rihA、rihB和rihC)活性;缺失高丝氨酸脱氢酶1(thrA)活性;缺失鸟氨酸氨甲酰转移酶(argF)活性。
该基因工程菌应用于发酵生产尿苷,在5L发酵罐发酵40‑70h可生产尿苷40‑67g/L,最大生产强度可达1.5g/(L×h),糖苷转化率为15‑25%,是目前报道的发酵法生产尿苷的最高水平。
专利名称 | 高产尿苷的基因工程菌及其构建方法与应用 | ||
专利状态 | 授权 | 公开号 | CN201810020944.3 |
申请号 | CN108130306A | 专利申请日期 | 2018-01-10 |
专利授权日期 | 2019-03-05 | 专利权届满日 | 2038-01-10 |
专利所属地 | 其他国家、地区 | 专利类型 | 发明 |
发明人 | 谢希贤;陈宁;吴鹤云;李国梁;李强;范晓光;徐庆阳;张成林;李燕军;马倩 | ||
权利人 | 天津科技大学 | ||
专利摘要 | 本发明提供一种高产尿苷的基因工程菌及其构建方法与应用,该菌是在大肠杆菌的基因组上整合了核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的嘧啶核苷操纵子pyrBCAKDFE,并由强启动子Ptrc启动,重构了尿苷合成途径;在基因组上对其自身的PRPP合成酶编码基因prsA进行双拷贝,由强启动子Ptrc启动;同时缺失尿苷激酶(udk)、尿苷磷酸化酶(udp)和核苷水解酶(rihA、rihB和rihC)活性;缺失高丝氨酸脱氢酶1(thrA)活性;缺失鸟氨酸氨甲酰转移酶(argF)活性。该基因工程菌应用于发酵生产尿苷,在5L发酵罐发酵40‑70h可生产尿苷40‑67g/L,最大生产强度可达1.5g/(L×h),糖苷转化率为15‑25%,是目前报道的发酵法生产尿苷的最高水平。 |