本项目主要针对糖化酶发酵生产时间长的特点,对糖化酶发酵生产技术进行创新研究,建立了以发酵液分割发酵为主要方法的发酵新技术,实现了糖化酶发酵生产水平的大幅度提高。

主要成果具体包括：。

1.在摇瓶和15L发酵罐条件下建立并优化了糖化酶的发酵液分割发酵技术 。在摇瓶和15L发酵罐条件下研究了将糖化酶发酵液1罐分割为3罐或5罐的发酵方法方法,并对分割时机和补料培养基进行了优化。优化条件为：在酶活线性增长结束时进行发酵液分割是最佳分割时机;优化的补料培养基为：最优补料培养基为：玉米淀粉20%,豆饼粉2.0%,玉米浆1.7%,硫酸铵0.3%,氯化钙0.1%。

2.在60T发酵罐发酵条件下建立并优化了糖化酶发酵液分割的发酵技术。 在60T发酵罐发酵条件下,发酵液分割的最佳时机为120小时,用15L罐试验获得的优化补充培养基配方进行发酵能明显提高糖化酶发酵酶活,发酵时间不变。在上述优化的工艺条件下,采用1罐分割为3罐发酵工艺（简称一分三工艺）时,分割后经38小时发酵即可获得最高酶活：54,200U/mL,平均单罐发酵时间为76小时。采用1罐分割为5罐发酵工艺（简称一分五工艺）时,分割后经42小时发酵即可获得最高酶活：56,100U/mL,平均单罐发酵时间66小时。相比原有生产工艺,酶活提高13%和17%,平均单罐发酵周期缩短47%和54%。

3.利用5个60T发酵罐进行了一分三工艺的试生产 试生产结果为：每周可获得9罐发酵液,平均酶活为54,181U/mL。不计算新工艺下酶活提高,则实际发酵强度提高80%,如按酶活总单位计算则发酵强度提高了90.3%。

4.利用7个60T发酵罐进行了一分五工艺的试生产成功进行了1次分罐发酵,共计获得10罐发酵液,平均发酵酶活力为56,100U/mL。以获得的总酶活水平计算,单位时间单位体积下的糖化酶产酶水平较原工业生产工艺提高133.5%。

5.针对新工艺下发酵液性状的改变优化了提取工艺 。 按发酵液放罐后发酵液体积14%比例进行补水,0.8%的比例使用生物絮凝剂,硅藻土用量为1.08%,在此条件下,滤液澄清率为99.5%,过滤速度为38.0mL/mim,酶的回收率为94.2%。与原有工艺相比,在同样体积下,硅藻土用量减少28%。如按同样发酵液体积相比,由于采用新工艺后补水量减少72%,实际体积减少23%,硅藻土的实际使用量减少45%。液体酶活得率由原有工艺的91.4%增加到94.2%。结合原有的超滤浓缩技术,将酶液浓缩至110,000U/mL以上,糖化酶总得率在93%以上;将酶液浓缩至26,0000U/mL以上,糖化酶酶活总得率在90%以上。