本发明涉及一种零皮肤内渗透水基免洗抑菌乳液的制备方法,配制的磺化纳米纤维素乳液采用均质机预剪切,提高转速并向上述磺化纳米纤维素乳液中逐滴滴加抑菌剂试液,待抑菌剂试液滴加结束后,提高转速至12000-13000r/min,并按对抑菌洗手液总重量的质量比依次加入硬脂酸1-2.5％,柠檬黄油0.8-1.25％,甘油1.9-2.0％,待所有组分加入完毕后,继续剪切20-30min制得零皮肤内渗透水基免洗抑菌乳液。本发明率先采用纯生物基磺化纳米纤维素负载杀菌剂,使其由游离态转变为复合态,增加其渗透阻力,降低向皮肤内部的渗透量。同时由于磺化纳米纤维素所特有的结膜能力,可以从根本上阻断杀菌剂向皮肤内部的毛细渗透路径,从而实现杀菌剂向皮肤内部的零渗透,提高免洗抑菌洗手液的生物安全性。