本发明提供了一种谷氨酸棒状杆菌生产菌及其构建方法与应用,以谷氨酸棒状杆菌作为底盘菌株,通过在底盘菌株中弱化α-酮戊二酸脱氢酶cgl1129、酰基辅酶A羧化酶cgl0700、脂肪酸合酶cgl0836和cgl2495、苹果酸脱氢酶cgl2380的表达,增强谷氨酸脱氢酶cgl2079、谷氨酸合酶cgl0184和cgl0185、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶cgl2863的表达,同时敲除异柠檬酸裂解酶cgl2331基因,获得改造成功后的目的菌株,该菌株具有较好的稳定性,发酵条件温和、产品分离提取简单、发酵周期短,同时产物外排能力强,单位时间生产效率提升明显,为谷氨酸的工业生产提供了新的思路,具有实际应用价值。