一种低温碱性蛋白酶及其制备方法
技术类型 ： 专利
专利所属地 ：中国
公开号 ：CN201110220386.3
技术成熟度 ：正在研发
转让方式 ：技术转让
交易价格：面议
应用领域 ： 生物基材料制造
技术领域 ：燃料电池技术
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成果概况
简介
本发明涉及一种低温碱性蛋白酶及其制备方法,属于用重组DNA技术定点突变野生型碱性蛋白酶基因,以改善其特性,并将突变后基因与大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒pBE2S连接,将其在枯草芽孢杆菌中高效表达的方法,涉及具有适冷性及碱稳定性的低温碱性蛋白酶及其制备方法。本发明解决了碱性蛋白酶在低温环境下活性较低,以致应用受限的问题。其技术方案是从微生物特别是嗜碱芽孢杆菌分离野生型碱性蛋白酶基因,对其Glu110、Glu134的氨基酸残基进行突变,经在枯草芽孢杆菌中高效表达,检测其发酵液酶活力达到1985U/mL,在40℃下,该低温碱性蛋白酶(Glu110&134Ala)比野生型碱性蛋白酶活力提高了28％；在10℃下,比野生型碱性蛋白酶活力提高了62％。
专利基本信息
| 专利名称 | 一种低温碱性蛋白酶及其制备方法 | ||
| 专利状态 | 其他 | 公开号 | CN201110220386.3 |
| 申请号 | CN102277344A | 专利申请日期 | 2011-08-03 |
| 专利授权日期 | 0001-01-01 | 专利权届满日 | - |
| 专利所属地 | 中国 | 专利类型 | 实用新型 |
| 发明人 | 天津科技大学 | ||
| 权利人 | 路福平,刘逸寒,刘敏尧,刘靓,薄嘉鑫,王春霞,王建玲 | ||
| 专利摘要 | 本发明涉及一种低温碱性蛋白酶及其制备方法,属于用重组DNA技术定点突变野生型碱性蛋白酶基因,以改善其特性,并将突变后基因与大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒pBE2S连接,将其在枯草芽孢杆菌中高效表达的方法,涉及具有适冷性及碱稳定性的低温碱性蛋白酶及其制备方法。本发明解决了碱性蛋白酶在低温环境下活性较低,以致应用受限的问题。其技术方案是从微生物特别是嗜碱芽孢杆菌分离野生型碱性蛋白酶基因,对其Glu110、Glu134的氨基酸残基进行突变,经在枯草芽孢杆菌中高效表达,检测其发酵液酶活力达到1985U/mL,在40℃下,该低温碱性蛋白酶(Glu110&134Ala)比野生型碱性蛋白酶活力提高了28％；在10℃下,比野生型碱性蛋白酶活力提高了62％。 | ||