一种催化活性提高的C11α-羟化酶突变体、方法及其应用

一种催化活性提高的C11α-羟化酶突变体、方法及其应用

技术类型 : 专利

专利所属地 :中国

公开号 :CN202311079970.0

技术成熟度 :正在研发

转让方式 :技术转让

交易价格:面议

应用领域 : 专用化学产品制造

技术领域 :微生物发酵技术

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成果概况
简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域,公开了一种催化活性提高的C11α-羟化酶突变体D118V,氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示,相应核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。本发明对赭曲霉来源的C11α-羟化酶进行定点饱和突变,利用酿酒酵母表达平台,获得使11α,17α-双羟基黄体酮产量提高的C11α-羟化酶突变体D118V,在底物17α-羟基黄体酮浓度为2g/L时,转化36h的11α,17α-双羟基黄体酮的浓度为1.19g/L,生产强度为758.15mg/(L·d),较野生型CYP68J5提高16.67%和172.77%,为甾体C11α羟化酶的改造提供应用案例和基础数据支撑。
专利基本信息
专利名称 一种催化活性提高的C11α-羟化酶突变体、方法及其应用
专利状态 实审 公开号 CN202311079970.0
申请号 CN117126820A 专利申请日期 2023-08-25
专利授权日期 0001-01-01 专利权届满日 -
专利所属地 中国 专利类型 发明
发明人 天津科技大学
权利人 骆健美,王敏,陈文慧,郑婷婷,史京辉
专利摘要 本发明属于基因工程和酶工程技术领域,公开了一种催化活性提高的C11α-羟化酶突变体D118V,氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示,相应核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。本发明对赭曲霉来源的C11α-羟化酶进行定点饱和突变,利用酿酒酵母表达平台,获得使11α,17α-双羟基黄体酮产量提高的C11α-羟化酶突变体D118V,在底物17α-羟基黄体酮浓度为2g/L时,转化36h的11α,17α-双羟基黄体酮的浓度为1.19g/L,生产强度为758.15mg/(L·d),较野生型CYP68J5提高16.67%和172.77%,为甾体C11α羟化酶的改造提供应用案例和基础数据支撑。