本发明公开一种免疫原、基于特异性蛋白检测克罗诺杆菌的方法及应用,所述免疫原的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。本发明基于筛选、验证获得可以代表克罗诺杆菌属内特异性的蛋白,通过原核系统进行特异性蛋白的重组表达并作为免疫原基于杂交瘤技术制备得到克罗诺杆菌单克隆抗体。利用制备的单克隆抗体,建立克罗诺杆菌胶体金快速检测方法。本发明的检测方法解决了目前克罗诺杆菌的检测方法中存在的检测成本高、检测环境受限、操作复杂的问题；本发明的试纸条可以快速简便地检测克罗诺杆菌并应用于实际样品中,对克罗诺杆菌的快速检测具有重要意义。