本发明公开了一种定点突变改造的裂解性多糖单加氧酶及其构建方法与应用,属于基因工程领域。所述酶的活性在纤维素的结晶多糖降解中提供降解功能。本发明所述裂解性多糖单加氧酶突变体,是由野生型嗜热毁丝霉的裂解性多糖单加氧酶的氨基酸序列基础上,发生第34位由Arg突变为Leu,该突变酶和野生酶的最适温度都为85℃,突变酶的比活力比野生酶显著提高2倍左右,且在pH大于5.5时,突变酶的比活力较野生酶显著高出2倍左右。以微晶纤维素为底物时,纤维素酶与突变酶的协同反应所产葡萄糖含量较以纤维素酶单独降解底物显著提高了48.5％,可以看出突变酶显著提高了酶活力,可以降低工业应用的经济成本。