本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种对异丁醇特异性响应的BmoR蛋白突变体,及其在异丁醇检测或生物传感器中的应用。所述BmoR蛋白突变体是在序列表SEQ ID NO.1所示的野生型BmoR蛋白的基础上发生包含M94V和/或F272L突变获得的。M94V/F272L突变体仅对异丁醇敏感,对正丁醇无响应,且对乙醇高度不敏感,解决了野生型BmoR蛋白无法区分正丁醇、异丁醇和乙醇的问题；同时对异丁醇的检测范围达到0-100mM,提高了BmoR蛋白对异丁醇的响应饱和度,可用于更高产量菌株的筛选和应用。