Fe＜sup＞2+＜/sup＞和α-酮戊二酸依赖型羟化酶的筛选方法及异亮氨酸羟化酶
技术类型 ： 专利
专利所属地 ：中国
公开号 ：CN201810369556.6
技术成熟度 ：正在研发
转让方式 ：技术转让
交易价格：面议
应用领域 ： 环境治理业
技术领域 ：资源与环境
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成果概况
简介
本发明涉及一种高活性Fe2+和α#酮戊二酸依赖型羟化酶的筛选方法,该方法首先构建α#酮戊二酸脱氢酶编码基因和异柠檬酸裂解酶编码基因缺失菌株,采用易错PCR技术扩增Fe2+和α#酮戊二酸依赖型羟化酶编码基因获得其突变体并连接至表达载体,然后将其转化至上述α#酮戊二酸脱氢酶编码基因和异柠檬酸裂解酶编码基因缺失菌株并于含α#酮戊二酸和相应底物的培养基中筛选生长速度快的菌株,提取其质粒并扩增羟化酶编码基因突变体。实现了高活性Fe2+和α#酮戊二酸依赖型羟化酶的高通量筛选,加快了该类酶的应用进程。
专利基本信息
| 专利名称 | Fe＜sup＞2+＜/sup＞和α-酮戊二酸依赖型羟化酶的筛选方法及异亮氨酸羟化酶 | ||
| 专利状态 | 其他 | 公开号 | CN201810369556.6 |
| 申请号 | CN108517328A | 专利申请日期 | 2018-04-24 |
| 专利授权日期 | 0001-01-01 | 专利权届满日 | - |
| 专利所属地 | 中国 | 专利类型 | 实用新型 |
| 发明人 | 天津科技大学 | ||
| 权利人 | 张成林,战俊杰,王道安,何继龙,陈宁,孟静,李英滋,朱福周,李智祥,赵磊,徐庆阳,谢希贤,李燕军,范晓光,马倩 | ||
| 专利摘要 | 本发明涉及一种高活性Fe2+和α#酮戊二酸依赖型羟化酶的筛选方法,该方法首先构建α#酮戊二酸脱氢酶编码基因和异柠檬酸裂解酶编码基因缺失菌株,采用易错PCR技术扩增Fe2+和α#酮戊二酸依赖型羟化酶编码基因获得其突变体并连接至表达载体,然后将其转化至上述α#酮戊二酸脱氢酶编码基因和异柠檬酸裂解酶编码基因缺失菌株并于含α#酮戊二酸和相应底物的培养基中筛选生长速度快的菌株,提取其质粒并扩增羟化酶编码基因突变体。实现了高活性Fe2+和α#酮戊二酸依赖型羟化酶的高通量筛选,加快了该类酶的应用进程。 | ||