技术类型 : 非专利
技术成熟度 :正在研发
发布时间:2017-01-01
合作案例:无
转让方式 :技术转让
交易价格:面议
应用领域 :生物药品制品制造
技术领域 :生物治疗技术和基因工程药物
通过本项目的资助,已按计划完成相关的研究任务,已发表国内核心期刊论文1篇,申请专利1项,目前还有一篇SCI文章在审稿中。
纳他霉素是一种高效、广谱、安全的多烯大环内酯类抗生素,能高效的抑制霉菌和酵母的生长,并且对哺乳动物细胞的毒性极低,因此被广泛应用于食品和医药领域中。本项目分别构建了pimE 、pimM和 vgb的过表达菌株和组合过表达菌株。
取得了以下成果。
1、以整合有红霉素启动子ermE*(Perm)的pIMEP为出发载体成功构建了六个表达载体。通过接合转移的方法获得六种不同的转化菌株,并通过抑菌圈实验和PCR验证等方法筛选、验证基因工程菌株。六种基因工程菌株在SS平板上传代培养7代后,菌株遗传性能稳定。
2、对六种基因工程菌株与出发菌株进行摇瓶发酵,结果表明。
与出发菌株相比,六种基因工程菌株的菌体生长曲线与出发菌株相似,但其纳他霉素产量各有不同,其中基因工程菌株S. gilvosporeus/ pIMEP:pimE、S. gilvosporeus/ pIMEP:pimM、S. gilvosporeus/ pIMEP:vgb的纳他霉素产量较出发菌株提高的百分比最高值分别为19.56%、17.77%、24.08%:S. gilvosporeus/ pIMEP:pimE:pimM、S. gilvosporeus/ pIMEP:pimM:vgb的纳他霉素产量较出发菌株提高的百分比最高值分别为40.28%、43.66%:然而S. gilvosporeus/ pIMEP:pimE:pimM:vgb的纳他霉素产量较出发菌株提高的百分比最高值为55.69%此技术将来应用于在工业生产可大幅度的降低生产成本,提高生产效益。
3、优化了纳他霉素发酵生产工艺。 通过在发酵过程中流加葡萄糖补料的方式,提高了那他霉素的产量,5L发酵罐第7天的产量约为10.136g/L。
通过本项目的资助,已按计划完成相关的研究任务,已发表国内核心期刊论文1篇,申请专利1项,目前还有一篇SCI文章在审稿中。