本发明属于微生物与基因工程技术领域,具体涉及一种低渗漏表达的木糖诱导型启动子Pxyl的突变体启动子PXC3及其应用。所述启动子PXC3是在来源于枯草芽胞杆菌的木糖诱导启动子Pxyl的+42区和+56区之间插入3个CRE元件获得,利用葡萄糖介导的CCR效应实现负调控蛋白阻滞RNA聚合酶的转录功能,使得添加特定比例葡萄糖的情况下能够更大限度的减弱诱导型启动子的渗漏表达。与此同时,在不添加葡萄糖只添加木糖的情况下,PXC3仍然保持与原始启动子Pxyl相当的转录水平。