一种基于Argonaute的通用型一步法检测食源性致病菌的方法及应用

一种基于Argonaute的通用型一步法检测食源性致病菌的方法及应用

技术类型 : 专利

专利所属地 :中国

公开号 :CN202310210645.7

技术成熟度 :正在研发

转让方式 :技术转让

交易价格:面议

应用领域 : 工业与专业设计及其他专业技术服务

技术领域 :科学分析仪器/检测仪器

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成果概况
简介
本发明公开了一种标签特异性引物延伸辅助的基于Argonaute的通用型检测食源性致病菌的方法,包括如下步骤:在待检测食源性致病菌的正向引物5’端加入一段标签特异性通用序列Tag,并进行磷酸化修饰;然后通过PCR扩增将Tag序列引入到待检测对象的扩增产物上;再加入核酸外切酶I,纯化;将纯化后的PCR产物加入PfAgo反应体系中,如果产生可视化的绿色荧光,则证明存在,如果不产生,则证明不存在。本发明方法是基于Argonaute的通用型的一步法检测食源性致病菌的方法,通过核酸提取、核酸扩增、荧光信号读出三部分,即可用于检测食品等复杂样本中的致病菌。本发明方法检测灵敏,最低检测限为1CFU/mL。
专利基本信息
专利名称 一种基于Argonaute的通用型一步法检测食源性致病菌的方法及应用
专利状态 授权 公开号 CN202310210645.7
申请号 CN116103419A 专利申请日期 2023-03-07
专利授权日期 2024-04-19 专利权届满日 2044-04-19
专利所属地 中国 专利类型 发明
发明人 天津科技大学
权利人 马龙,李雅茹,赵枳熒,满淑丽
专利摘要 本发明公开了一种标签特异性引物延伸辅助的基于Argonaute的通用型检测食源性致病菌的方法,包括如下步骤:在待检测食源性致病菌的正向引物5’端加入一段标签特异性通用序列Tag,并进行磷酸化修饰;然后通过PCR扩增将Tag序列引入到待检测对象的扩增产物上;再加入核酸外切酶I,纯化;将纯化后的PCR产物加入PfAgo反应体系中,如果产生可视化的绿色荧光,则证明存在,如果不产生,则证明不存在。本发明方法是基于Argonaute的通用型的一步法检测食源性致病菌的方法,通过核酸提取、核酸扩增、荧光信号读出三部分,即可用于检测食品等复杂样本中的致病菌。本发明方法检测灵敏,最低检测限为1CFU/mL。