一种干涉膨胀素基因Exp2制备植物悬浮培养小细胞系的方法
技术类型 ： 专利
专利所属地 ：中国
公开号 ：CN201210229725.9
技术成熟度 ：正在研发
转让方式 ：技术转让
交易价格：面议
应用领域 ： 生物基材料制造
技术领域 ：新型疫苗
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成果概况
简介
一种干涉膨胀素基因Exp2制备植物悬浮培养小细胞系的方法,本发明属于生物技术领域。首先,选定基因Exp2两个保守区分别为正向片段I、II以及对应的反向序列I’和II’；构建I-AC-II’-II-CT-I’的RNAi片段；并筛选出其插在pCAMBIA2300植物表达载体的根瘤农杆菌工程菌。然后,以甘草为例,农杆菌介导法依次获得转化的愈伤组织及其稳定表达的悬浮细胞。再次,通过看护培养,利用悬浮细胞,筛选生长速度快、效果好的单细胞系愈伤组织以及由此形成的悬浮细胞系。最后,通过培养工艺优化,获得悬浮细胞生长和产物积累的最佳发酵工艺参数。利用本发明方法获得的密度大、培养周期短、成本低、生产效率高的细胞系,为大规模开发和生产药用植物有效成分提供优质种源。
专利基本信息
| 专利名称 | 一种干涉膨胀素基因Exp2制备植物悬浮培养小细胞系的方法 | ||
| 专利状态 | 其他 | 公开号 | CN201210229725.9 |
| 申请号 | CN102839155A | 专利申请日期 | 2012-07-05 |
| 专利授权日期 | 0001-01-01 | 专利权届满日 | - |
| 专利所属地 | 中国 | 专利类型 | 实用新型 |
| 发明人 | 天津科技大学 | ||
| 权利人 | 李兴林,肖天剑,韩杨,曹爱佳,高洁,张黎明,赵俊,满淑丽,高文远 | ||
| 专利摘要 | 一种干涉膨胀素基因Exp2制备植物悬浮培养小细胞系的方法,本发明属于生物技术领域。首先,选定基因Exp2两个保守区分别为正向片段I、II以及对应的反向序列I’和II’；构建I-AC-II’-II-CT-I’的RNAi片段；并筛选出其插在pCAMBIA2300植物表达载体的根瘤农杆菌工程菌。然后,以甘草为例,农杆菌介导法依次获得转化的愈伤组织及其稳定表达的悬浮细胞。再次,通过看护培养,利用悬浮细胞,筛选生长速度快、效果好的单细胞系愈伤组织以及由此形成的悬浮细胞系。最后,通过培养工艺优化,获得悬浮细胞生长和产物积累的最佳发酵工艺参数。利用本发明方法获得的密度大、培养周期短、成本低、生产效率高的细胞系,为大规模开发和生产药用植物有效成分提供优质种源。 | ||