本发明涉及一种利用rpsL基因突变率检测评估食品污染物遗传毒性的方法,其特征在于：包括提取质粒pMOL21、质粒转入宿主细胞、食品污染物处理、基因突变率的检测、食品污染物培养及食品污染物遗传毒性的评估几个步骤,同时利用rpsL基因突变率的正向筛选系统进行检测,是一种灵敏度高且简便易行的体外短期致突变实验方法,可以为检测食品加工过程中产生的潜在致癌物提供一种快速有效的分析方法,应用这种方法所获得的遗传毒性资料将是食品有毒物质资料库的有力补充,对制定食品安全法规和标准具有重要的理论指导价值。