本发明公开了一类具有抗肿瘤活性的新型5-酰胺基取代的靛红类衍生物。利用5-硝基靛红进行苄基化取代、羰基保护、硝基还原,酰胺缩合反应、羰基脱保护得到5-酰胺基取代的靛红类衍生物。本发明首次合成了该系列5-酰胺基取代的靛红类衍生物,体外抗肿瘤活性研究证明,本发明提供的新型5-酰胺基取代的靛红类衍生物对多种肿瘤细胞,包括人白血病细胞、人肝癌细胞和人结肠癌细胞具有很强的抗肿瘤活性,可望开发成新的抗肿瘤药物。