本发明提供了一种循环发酵生产L-赖氨酸的方法,利用谷氨酸棒杆菌发酵生产L-赖氨酸,包括分批补料发酵与培养基替换循环发酵,菌体循环利用包括发酵清液的离心分离与菌体的回收利用。所述方法通过循环利用菌体,降低了发酵培养过程中因菌体生长消耗得碳源,提高了糖酸转化率；通过分离发酵液上清并加入新鲜培养基,减小了高浓度赖氨酸对生产的抑制,降低了副产物的积累,消除高浓度硫酸盐对菌体的伤害,补充了充足的营养物质,维持菌体活力,延长产酸周期,延缓了菌体的衰亡；增加了发酵罐的装料量,提高了设备利用率,提高单次发酵的糖酸转化率与总产酸量,提高生产效率的同时降低人力成本,增加产品竞争力。