本发明提供了一种耐酸性苏氨酸生产菌的构建方法，并通过该方法获得的耐酸性苏氨酸生产菌可用于制备苏氨酸，利用谷氨酸氧化酶基因对谷氨酸进行脱氨反应，将其转化为α‑酮戊二酸，生成的游离NH3和H2O2则可以中和胞内多余的质子从而提高菌体的耐酸能力，所述耐酸系统能够有效应用到生物产品的发酵生产中，该系统不会产生对菌体具有抑制作用的γ‑氨基丁酸或胍丁胺，不需要表达γ‑氨基丁酸或胍丁胺转运蛋白的基因，减少了重组菌株的负担；

反应中生成的α‑酮戊二酸可以直接进入TCA循环，为菌体生长提供能量，有效减少液氨的用量，并且有效避免了pH波动对发酵造成的影响。