本发明提供了一种同时检测磺胺喹噁啉和诺氟沙星两种兽药多残留免疫层析试纸条,包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背板,其特征在于,在PVC背板上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫,其中结合垫一半覆盖在硝酸纤维素膜上,样品垫部分覆盖于结合垫上,吸水垫部分覆盖于硝酸纤维素膜上；所述的硝酸纤维素膜上平行设置一条质控线和两条检测线。本发明还公开了这种基于两种可视化颜色试纸条的制备方法。本发明具有以下突出的优点：本发明的检测磺胺喹噁啉和诺氟沙星兽药多残留免疫层析试纸条是利用抗原抗体的特异性反应实现的,因此特异性高,灵敏度好。