本发明涉及一种采用喷雾干燥法破碎乳酸菌细胞壁制备胞内乳糖酶粉剂的方法,调节喷雾干燥机进料温度和风速等运行参数,利用高温使乳酸菌细胞涨破释放胞内乳糖酶,同时添加保护剂保护乳糖酶活性,制备乳糖酶粉剂。所述保护剂为糊精、脱脂奶粉与糊精的混合物,酶活回收率可达到80％以上。本发明利用高温破坏细胞壁,避免了氯仿等化学试剂的使用,极大地降低了生产过程对环境的污染压力,同时也避免了乳糖酶产品中污染有机试剂的可能性。实现了乳糖酶的绿色生产。本发明将制备粗酶液和制备酶固体粉剂两个过程合并,极大地简化了生产工艺,提高了生产效率。本发明可以适用于任何细胞胞内酶的制备,包括细菌、真菌、动物细胞核植物细胞等。