本发明涉及一种HER2靶向的抗肿瘤多肽纳米药物及其制备方法和应用,所述抗肿瘤多肽纳米药物包括依次连接的抗肿瘤功能单元、自组装单元和靶向单元；所述靶向单元包括靶向HER2蛋白的多肽序列。所述多肽纳米药物通过多肽序列的特殊设计使其能够通过分子识别的主动靶向方式递送到病灶部位,然后特异性与HER2靶点结合,实现在肿瘤部位的原位自组装,形成的组装体对肿瘤有明显的杀伤效果,且其制备成本低,在肿瘤的靶向诊断和治疗方面具有优势和重要的应用前景。