一种高效的酿酒酵母无痕基因敲除方法及其应用

一种高效的酿酒酵母无痕基因敲除方法及其应用

专利类型 :发明

专利所属地 :中国

公开号:CN201810748064.8

专利申请日 :2018-07-10

技术成熟度: 正在研发

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交易价格:¥ 面议

技术领域 :生物治疗技术和基因工程药物

应用领域 :酒的制造

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专利技术详情
简介

本发明公布了一种在酿酒酵母中高效无痕敲除的方法,并通过对该无痕基因敲除系统中的正向同源序列、半乳糖浓度及半乳糖诱导时间进行优化,第二步同源重组的概率达到6.86×10?4。

以酿酒酵母AY15的单倍体α5为出发菌株,BAT2基因为靶基因,实现对野生酿酒酵母菌株基因BAT2高效的无痕敲除,通过白酒发酵实验,改造菌株的正丙醇、异丁醇和异戊醇含量亲本菌株相比分别降低了20.32%、47.85%和23.14%,达到了低产高级醇的目的。

该方法可广泛应用于酵母及其他微生物的基因改造,由于所获得的突变株不残留任何外源基因,可以安全的用于工业生产,为直接在工业菌株中进行基因敲除提供了有益的参考。

技术优势
暂无信息
市场优势/合作案例
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成果荣誉
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专利基本信息
专利状态 授权 公开号 CN201810748064.8
申请号 CN109136254A 专利申请日期 2018-07-10
专利授权日期 2021-06-04 专利权届满日 2038-07-10
专利所属地 中国 专利类型 发明
发明人 张翠英;肖冬光;李凭;王建辉;郭学武;陈叶福;董健;杜丽平;马立娟;于爱群
权利人 天津科技大学
专利摘要 本发明公布了一种在酿酒酵母中高效无痕敲除的方法,并通过对该无痕基因敲除系统中的正向同源序列、半乳糖浓度及半乳糖诱导时间进行优化,第二步同源重组的概率达到6.86×10‑4。以酿酒酵母AY15的单倍体α5为出发菌株,BAT2基因为靶基因,实现对野生酿酒酵母菌株基因BAT2高效的无痕敲除,通过白酒发酵实验,改造菌株的正丙醇、异丁醇和异戊醇含量亲本菌株相比分别降低了20.32%、47.85%和23.14%,达到了低产高级醇的目的。该方法可广泛应用于酵母及其他微生物的基因改造,由于所获得的突变株不残留任何外源基因,可以安全的用于工业生产,为直接在工业菌株中进行基因敲除提供了有益的参考。
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