专利类型 :发明
专利所属地 :中国
公开号:CN202011513325.1
专利申请日 :2020-12-21
技术成熟度: 正在研发
是否有样品或样机:无
技术转让
技术领域 :生物治疗技术和基因工程药物
应用领域 :生物药品制品制造
联系人:林经理
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本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。
本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA,经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列,将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变,通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因,再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组,通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。
将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达,得到产酶活力提高的重组菌株,进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
专利状态 | 授权 | 公开号 | CN202011513325.1 |
申请号 | CN112501149A | 专利申请日期 | 2020-12-21 |
专利授权日期 | 2022-03-18 | 专利权届满日 | 2040-12-21 |
专利所属地 | 中国 | 专利类型 | 发明 |
发明人 | 路福平;刘逸寒;李玉;张元夫;王兴吉;王克芬;刘文龙;刘夫锋;张会图 | ||
权利人 | 天津科技大学 | ||
专利摘要 | 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA,经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列,将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变,通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因,再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组,通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达,得到产酶活力提高的重组菌株,进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。 |
01
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交易完成
交易完成
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