本发明涉及一种制备尿苷酸用酶制剂以及酶催化制备尿苷酸的方法，该制备方法采用含尿苷的料液为底物，加入具有尿苷激酶和聚磷酸激酶活性的大肠杆菌细胞破碎液、六偏磷酸钠、硫酸镁和少量ATP，在pH 8.0，温度30℃的反应条件下进行酶促反应合成尿苷酸。

在上述偶联催化反应体系中，尿苷激酶负责催化尿苷和ATP生成尿苷酸，同时伴随着ATP去磷酸化形成ADP。聚磷酸激酶负责催化六偏磷酸钠和ADP形成ATP，从而实现反应中ATP的再生。

本发明提供的尿苷酸生产方法具有原料价格低廉，周期短，操作简便，绿色环保，产率高的优点，具有良好的工业应用价值。