本项目组在前期工作中将红薯的β-淀粉酶基因进行异源表达,以期得到β-淀粉酶的高效制备方法;本项目组从自然界中筛选到一株具有异淀粉酶活力的芽孢杆菌,Bacillus sp.272。酶学性质分析显示,该异淀粉酶耐热性较好,能够应用于工业生产,进一步讲上述两种酶配合使用,得到一种高效率、高转化率的超高麦芽糖浆的制备技术。

主要成果包括。

1.β-淀粉酶的制备 通过基因工程手段获得红薯β-淀粉酶基因,构建高表达质粒,分别并导入不同的表达宿主中,摇瓶发酵筛选高表达转化子,通过15L罐进一步确定一株酶活最高的转化子,发酵酶活可达265DPo/mL,并完善了相关后提取工艺,成品酶活力达到1500 DPo/g。

2.异淀粉酶的制备 分离筛选获得产异淀粉酶的高温菌,并从中筛选酶学性质优良的一株异淀粉酶高产菌,经过工艺优化与放大,发酵水平达到10,000U/mL以上。

3.超高麦芽糖浆制备工艺。

淀粉经调浆至17～18波美度,调pH值5.8～6.2,通过高温酶高温喷射或者高温酶和中温酶配合使用,控制液化结束DE值2～10即可在合适的糖化温度、糖化pH下,比较单独使用β-淀粉酶、β-淀粉酶与异淀粉酶配合使用、β-淀粉酶与普鲁兰酶配合使用后麦芽糖含量,确定超高麦芽糖浆的制备工艺。