技术类型 : 非专利
技术成熟度 :通过中试
合作案例:无
转让方式 :技术转让
交易价格:面议
应用领域 :生物药品制品制造
技术领域 :快速生物检测技术
肥胖被称为21世纪头号健康杀手,严重威胁到人类健康,关于肥胖症的研究已经成为热点,大众关于肥胖症的重视程度也是如火如荼。
遗传因素对肥胖的影响
研究发现遗传对肥胖的影响巨大,约占40%--60%,也就是说,一半左右的肥胖症都是由遗传因素所决定的。IFT27具有调节食欲和能量代谢功能的作用,2014年,有关ift27的研究指出其表达量高低与纤毛病的表征有密切关系,科学性得到证实。
实验方法和结果
在本课题中构建了一套原核融合表达载体,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后表达His-IFT27融合蛋白。将通过亲和纯化得到的His-IFT27作为抗原来免疫新西兰大白兔。采用间接ELISA方法对其进行进行效价测定。经过四次免疫后效价达到128000以上。将得到的抗血清首先进行ProteinA亲和纯化,接着利用另一标签抗原His-IFT27融合蛋白对其进行膜纯化。通过免疫印迹检测莱茵衣藻中的IFT27,结果表明制备的多克隆抗体特异性较好,通过检测正常人体中IFT27表达量的高低确定早期肥胖症的检出标准。
试剂盒的制备和组装
通过方阵滴定进行样品稀释度的确定、血清作用时间的确定、底物液作用时间的确定等实验确定最佳抗原和多抗稀释度。将试剂盒内组分(抗原、多抗、稀释液、强阳性对照、弱阳性对照、阴性对照、去离子水、包被液、底物液、终止液)最终确定与组装,编写试剂盒说明书。