基于CRISPR-Cas 系统的病原微生物快速超灵敏可视化检测技术

基于CRISPR-Cas 系统的病原微生物快速超灵敏可视化检测技术

技术类型 : 专利

专利所属地 :中国

公开号 :CN111321234B

技术成熟度 :小试阶段

合作案例:

转让方式 :合作开发

交易价格:面议

应用领域 : 医院

技术领域 :快速生物检测技术

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成果概况
简介

主要内容:利用 CRISPR-Cas12a/-Cas13a的非特异附属切割核酸活性,结合等温扩增以及纳米金显色,建立的一套病原微生物快速超灵敏可视化检测技术。

经济社会价值:本检测技术具备更低成本、更高灵敏度、更高特异性、检测用时更短、不需要荧光定量PCR仪器等优势,可联合纳米金、胶体金试纸条等实现现场化、可视化快速微生物检测,具有广阔市场前景。

技术优势

  1、检测时间短,全流程检测时长缩短到1小时内。2、检测灵敏度超过99%、特异性100%,已实验证实金黄色葡萄球菌检测灵敏度达到2CFU/毫升,新型冠状病毒检测灵敏度达一个拷贝。3、可视化现场检测,结合等温扩增技术和纳米金显色,可实现可视化、现场化检测。

市场优势/合作案例
暂无信息
成果荣誉

  已申请中国发明专利2项:一种利用核酸适配体和磁性材料检测凝血酶的荧光检测方法

一种基于CRISPR-Cas13a系统检测微生物的方法及应用

专利基本信息
专利名称 一种基于CRISPR-Cas13a系统检测微生物的方法及应用
专利状态 授权 公开号 CN111321234B
申请号 CN202010083137.3 专利申请日期 2020-02-08
专利授权日期 2023-10-03 专利权届满日 2040-02-08
专利所属地 中国 专利类型 发明
发明人 马龙; 满淑丽
权利人 天津科技大学
专利摘要 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas13a检测微生物的方法,首先对待测细菌进行前处理,提取其基因组,通过PCR扩增以及体外转录两步得到RNA,称作target RNA。当target RNA存在时可以激发Cas13a‑crRNA复合物的附属切割能力,即切割无关单链RNA。在此RNA一端修饰荧光基团,另一端修饰淬灭基团。当Cas13a‑crRNA复合物检测到相应的Target RNA时,能够切割荧光探针,导致荧光值增加,荧光值的增长与待测细菌存在线性对应关系,利用此来检测微生物。本方法具有出色的可靠性、极高的灵敏性、高度的特异性、易于实施和检测所需时间短的特点,其对微生物的检测具有巨大潜力。
专利名称 一种利用核酸适配体和磁性材料检测凝血酶的荧光检测方法
专利状态 授权 公开号 CN107841527B
申请号 CN201711083141 专利申请日期 2017-11-07
专利授权日期 2022-01-08 专利权届满日 2037-11-07
专利所属地 中国 专利类型 发明
发明人 马龙; 刁爱坡; 满淑丽; 孙娜娜
权利人 天津科技大学
专利摘要 本发明涉及一种利用核酸适配体和磁性材料检测凝血酶(thrombin)的荧光检测方法,提供了一种基于核酸适配体和PEI‑Fe3O4检测凝血酶浓度的新型生物传感器,其中寡核苷酸带负电荷,PEI‑Fe3O4富含氨基而带正电,在缓冲液中,荧光标记的核酸适配体与PEI‑Fe3O4因静电引力而吸附到Fe3O4的表面而使荧光猝灭。在核酸适配体/PEI‑Fe3O4复合物体系中加入凝血酶,凝血酶与适配体结合从而使其远离PEI‑Fe3O4的表面,荧光得以恢复。所以,通过荧光值的变化,可以检测出凝血酶的浓度,本发现只需要改变核酸适配体的序列,就可以实现对其他底物分子的检测,在凝血酶检测领域具有重大的研究和应用意义。